新型內鏡下肌肉活檢技術，漲姿勢！

【據《Gastrointetest Endosc》2017年7月報道】題：十二指腸和直腸內鏡下肌活檢：一項肌間神經豬模型生存研究（作者Rajan E等）

來源 | 醫學界消化頻道

作者 | 劉小六

我們對胃腸動力疾病如功能性胃腸病、假性小腸梗阻和慢傳輸型便秘等的認識仍有巨大空白，很大程度上是因為很難獲得胃腸道肌組織病理。現有的病理分析樣本多來自外科手術切除標本，而很少有動力性疾病患者需要手術治療，這大大限制了我們對動力疾病的研究。

美國梅奧醫學中心內鏡科醫師Rajan E等，去年9月在《Gastrointetest Endosc》雜誌上發表的一篇文章，報道了3例先天性胃輕癱患者在梅奧醫學中心通過一種新型內鏡下肌肉活檢技術，成功獲得胃肌層樣本。但小腸和結腸肌肉組織樣本仍需要外科手術獲得。為了探索小腸與結腸肌組織內鏡下取材的可行性，Rajan E等近期在豬模型中進行了一系列新研究，嘗試通過非侵入性檢查獲得固有肌層（muscularis propria，MP）標本，分析組織細胞類型及肌間神經狀態。

該研究選取5隻40 kg豬行內鏡肌活檢。每頭豬都行內鏡下十二指腸肌活檢（duodenal endoscopic muscle，dEMB）和內鏡直腸肌活檢（rectal endoscopic muscle biopsy，rEMB）。十二指腸壁非常薄，dEMB選用單側Padlock Clip（圖1）輔助切除技術。Padlock Clip內徑11 mm（圖2），帽深10 mm。選取十二指腸橫部側壁，將十二指腸組織吸進帽夾內，十二指腸壁形成假息肉樣，隨後用電凝圈套器將其切除。切除創面約5 mm，以確保創面無穿孔。因此該技術也稱為「無洞」dEMB（圖3-A、B）。根據前期胃MP的研究，Rajan E等認為rEMB需要用Padlock Clip雙切輔助技術。選取直腸中段，即距肛緣5-10 cm間。先行EMR繃帶結紮切除黏膜層，暴露下部肌層（圖4-A、B）。隨後用Padlock Clip將組織吸進帽夾，展開帽夾用電凝切除MP形成的假息肉。用一種蛋白基因產物（PGP）抗體9.5檢測樣本是否有肌間神經。實驗動物保證存活2周，之後再行胃鏡及屍檢。

圖1 星形廣面環夾（over-the-scope）。

圖2 內鏡下可見星形環夾直徑11 mm。

圖3-A 內鏡可見十二指腸壁假息肉形成。

圖3-B dEMB術后即刻圖像。

圖4-A EMR用繃帶結紮方法暴露直腸肌層（箭頭處）。

圖4-B 內鏡切除直腸肌層形成的假息肉。

圖5 切除的十二指腸壁。

所有動物dEMB和rEMB 操作過程都順利，使用這種「無洞」（夾閉隨後切除）方法未出現併發症。dEMB和rEMB 平均操作時間23.7±2.5分鐘和13.25±2.8分鐘。十二指腸壁全層切除長度13.25±4.3 mm（圖5），直腸12.5±1.7 mm（圖6）。樣本HE染色（圖7-A、B），用PGP 9.5確認樣本有無MP，測量樣本外部長度，觀察肌層及肌間神經（8-A、B）。所有動物臨床觀察期均無併發症出現。2周后重複胃鏡可見dEMB 創面完全癒合，未見潰瘍面。屍檢也未見穿孔，也未見dEMB和rEMB創面局部形成包塊或膿腫。

從這項豬模型研究我們看到dEMB和rEMB在技術上是可行的，可重複且安全。不僅能獲得足夠的MP樣，還能觀察肌間神經。這是一項巨大的進步，使胃腸道動力疾病的研究從臨床診斷進入分子病理診斷時代。

圖6 切除的直腸壁。

圖7-A 十二指腸HE染色（10X）：可見十二指腸內層環肌（CM），外層縱肌（LM）和肌間神經束（MYP）。

圖7-B 直腸HE染色（10X）：可見直腸內層環肌（CM），外層縱肌（LM）和肌間神經束（MYP）。

圖8-A 蛋白基因抗體（PGP）9.5（10X）免疫組化：十二指腸內側環形肌（CM），外側縱行肌（LM）和肌間神經束（MYP）。

圖8-B 蛋白基因抗體（PGP）9.5（10X）免疫組化：直腸內側環形肌（CM），外側縱行肌（LM）和肌間神經束（MYP）。