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銀河有難，我們不能袖手旁觀銀河護衛隊在這集中穿越宇宙，繼續外太空的史詩冒險之旅。他們必須共同作戰，守護彼此；同時要解開「星爵」彼得·奎爾的身世之謎。舊日敵人變為盟友，漫畫中深受喜愛的角色也會現身，對護衛隊出手援助。他們自稱「銀河護衛隊」星爵（克里斯·帕拉特 飾）擁有半人類血統,自從和同伴們拯救銀河系后成為新晉紅人，個人也十分享受受人追捧的感覺。正當銀河護衛隊聲名遠播的時候，奎爾失散已久的父親突然現身，這讓奎爾與其他護衛隊隊員的關係陷入了考驗。火箭浣熊（布萊德利·庫珀 飾）一位被高度機械改造的智能擬人化浣熊， 儘管有時心不甘情不願，但他仍然是銀河護衛隊中重要的一員。自從摯友格魯特變成小樹苗后，火箭不得不化身為奶爸，艱難地開始照顧能力不足的格魯特寶寶。如果護衛隊不會被他的衝動撕扯得四分五裂，他可能真會是隊伍中的核心角色。格魯特（范·迪塞爾 飾）格魯特是X行星的花神巨像族，他擁有無窮的力量，極度地聰明也可以控制樹木，並融合樹木治癒自己的傷口、獲取營養和增強力量，也不怕火。毀滅者德拉克斯（戴夫·巴蒂斯塔 飾）毀滅者可以稱為銀河浩克，有著和綠巨人一樣的大塊頭，還擁有超人類體能，幾乎可以抵禦一切物理攻擊，他的主要武器是雙刀。他可以飛行和發射能量波（後來毀滅者失去這兩種技能），在沒有水和食物的情況下，毀滅者也能在外太空生存。他還擁有強大感應能力。卡魔拉（佐伊·索爾達娜 飾）滅霸的養女，當時的她只能給人帶來恐懼和痛苦，因為她是在按父親的旨意行事。現在卡魔拉正在經歷自己的救贖之路，她加入了銀河護衛隊的大家庭，儘管還有點格格不入，對她來說非常重要，她要保護團隊，並在做出決定時保持精明和理智。銀河有難，我們不能袖手旁觀。你是我們最後的希望。我們的世界正面臨滅頂之災。生活總是索取大於給予。因為自己的仇恨而連累別人的人不值得同情你是說120億人的生命，都寄托在一個小偷······ 兩個暴徒······ 一個殺手和一個瘋子身上。