5月是黑色素瘤意識月，盤點黑色素瘤研究最新進展

黑色素瘤，又稱惡性黑色素瘤，是來源於黑色素細胞的一類惡性腫瘤，常見於皮膚，亦見於黏膜、眼脈絡膜等部位。在亞洲人和有色人種中，原發於皮膚的黑色素瘤佔50%～70%，最常見的原發部位為肢端（約佔所有黑色素瘤的50%），即足底、足趾、手指末端及甲下等部位，其次為粘膜黑色素瘤（約佔20%左右），而歐美白種人這兩種亞型僅占所有黑色素瘤的5%。黑色素瘤是皮膚腫瘤中惡性程度最高的瘤種，容易出現遠處轉移。早期診斷和治療因而顯得尤為重要。

當黑色素細胞發生惡性轉化就會出現黑色素瘤。過度的紫外線照射是明確的黑色素瘤病因之一。紫外線可以損傷皮膚細胞的DNA引起黑色素瘤。如果能夠在黑色素瘤細胞離開皮膚進入淋巴結以及身體其他部位之前發現它，病人的五年生存率可以達到91.5%。而如果在比較晚期發現這種癌症，那麼病人的五年生存率將只有30%~60%。

大約40%～60%的黑色素瘤存在BRAF蛋白突變。適用於晚期BRAF突變黑色素瘤病人的治療方法主要歸為兩大類：靶向治療，比如化療，能夠阻止癌症生長和擴散；免疫治療，通過刺激免疫系統攻擊腫瘤細胞。

2017年5月是黑色素瘤意識月（Melanoma Awareness Month），其目的在於提高對黑色素瘤的意識，增加早期檢測的幾率以便較早地進行治療。基於此，小編針對近期黑色素瘤研究取得的進展進行一番梳理，以饗讀者。

1.Nature：黑色素瘤個體化療法開發取得重大進展！

doi:10.1038/nature22079

儘管基於阻斷程序性細胞死亡1受體蛋白(PD-1)的免疫療法能夠成功治療轉移性的黑色素瘤患者，但仍有超過一半的患者並不會通過看到腫瘤萎縮而獲得長期的治療效益，其中一種可能性的原因就是藥物並沒有在這些患者機體中發揮應有的作用，這些PD-1阻斷藥物在很多患者機體中缺少一種生物學效應；然而，最近一項刊登於國際雜誌Nature上的研究報告中，來自賓夕法尼亞大學等機構的研究人員通過研究表明，實際上，大約80%的患者機體中對這些療法產生反應的T細胞數量都會增加，PD-1靶向抗體pembrolizumab是一種檢查點抑製劑藥物，其能夠有效抑制PD-1受體從而就能夠促進T細胞複製並且對癌細胞產生強烈的反應。

但為何促進腫瘤收縮和增加患者機體中T細胞的數量之間存在一定的脫節關係呢？這項研究中研究人員就給出了一定的研究線索；E. John Wherry教授指出，我們發現，患者機體中治療前腫瘤的尺寸能夠確定T細胞對藥物產生反應來抑制患者機體腫瘤的強度，腫瘤尺寸越大，藥物所激活的T細胞的活化能力就會越強，很多患者經歷的臨床失敗並不僅僅是因為機體免疫系統無法被激活，而且還因為T細胞再度活化的強度和機體原始腫瘤負擔失衡所致。

利用pembrolizumab治療前後IV級黑色素瘤患者機體中外周血的免疫分析結果，研究人員就鑒別出了療法開始時相比腫瘤尺寸而言循環T細胞所發生的的改變，同時研究者還對47名患者機體的血液改變進行了研究，這些參數之間的關係或許能夠幫助深入闡明患者機體對免疫療法的反應。Jedd Wolchok博士表示，這項研究能夠幫助回答一些關鍵的問題，即為何某些患者對抗PD-1抑製劑療法並無反應而為何有些患者卻能夠產生反應，我們想通過研究理解利用抗PD-1抗體療法治療患者時其機體免疫系統所發生的變化，同時對這些患者機體中發生的免疫學變化進行定性研究。

當黑色素瘤患者對PD-1阻斷劑沒有反應時，並不完全是出於同樣的原因，但將免疫反應重新激活機體同腫瘤負擔進行聯繫時，研究者提出了檢查點抑製劑療法失敗的三種原因，即這種療法並不能有效促進機體免疫反應再度激活，相比腫瘤尺寸而言免疫效應不充足或者藥物發生了脫靶。Wherry說道，這項研究中我們鑒別出了多種療法失敗的情況，這對於後期開發新一代治療措施非常關鍵。

研究者表示，當新型療法使用后3-6周，他們將會利用這種方法來檢測其它患者是否會因這種藥物而獲益，在PD-1臨床試驗中，其相比正常12周的重點療法要早6周，如果患者並不會因pembrolizumab而獲益，臨床醫生就會採用其它類型的藥物來放大患者機體對第一種藥物的免疫響應，他們會將額外療法同首次PD-1阻斷劑療法失敗的類型相匹配來對患者進行治療。

2.PCMR：利用新方法培養出用於黑色素瘤研究的小鼠細胞系

doi:10.1111/pcmr.12220

在一項新的研究中，來自美國達特茅斯大學蓋澤爾醫學院(Dartmouth Geisel School of Medicine)的研究人員開發出一種允許從小鼠黑色素瘤中收集的細胞在體外細胞培養中容易生長的方法，並且利用這種方法培養出多種對PLX4032敏感的小鼠BRafV600E黑色素瘤細胞系。相關研究結果近期發表在Pigment Cell & Melanoma Research期刊上，論文標題為「Multiple murine BRafV600E melanoma cell lines with sensitivity to PLX4032」。

鑒於一般的小鼠細胞系缺乏在人黑色素瘤中經常普遍存在的這種BRAF突變，並且這些細胞系在體外培養時生長緩慢，因此它們不能代表人黑色素瘤細胞系。對控制小鼠細胞系行為的分子機制進行詳細研究一直存在困難，這是因為當前可獲得的小鼠細胞系在體外培養中不能很好地生長。

在這項研究中，研究人員是首次開發出一種允許從小鼠腫瘤中收集到的黑色素瘤細胞在體外細胞培養時容易生長的方法。重要的是，這些細胞系與免疫功能完好的小鼠品種在遺傳上是匹配的，而不像人細胞需要被植入到免疫功能受到削弱的小鼠體內才能生長。因此，能夠在體外細胞培養物中和具有完整免疫系統的小鼠體內研究這些小鼠黑色素瘤細胞系是實驗上的一大優勢。

3.納米顆粒攜帶藥物組合可治療黑色素瘤

doi:10.1158/1535-7163.MCT-16-0285

來自美國的研究人員開發了一類新型藥物，可以藉助納米顆粒對一種藥物組合進行運輸這樣可以避免黑色素瘤產生治療抵抗。這種叫做CelePlum-777的藥物包含了一定比例的抗炎藥物Celecoxib和毒性藥物Plumbagin，通過這兩種藥物的結合，細胞很難產生抵抗。

Celecoxib和Plumbagin以特定比例聯合使用能夠協同殺死黑色素瘤細胞。研究人員藉助納米顆粒將藥物直接送達癌細胞，「將多種藥物裝載到納米顆粒中是一個創新方法，可以將多種癌症藥物同時送達需要它們發揮作用的部位。另外一個優勢就是通過藥物聯合，可以使用更為有效且毒性更小的藥物濃度。」領導該研究的Raghavendra Gowda教授這樣說道。

Celecoxib和Plumbagin無法通過口服的方式很好地進入體內，因此不能達到發揮毒性殺傷作用所需的藥物比例。CelePlum-777可以通過靜脈注射的方式注入體內，因為藥物尺寸小可以在腫瘤內部積累隨後釋放藥物殺死癌細胞。研究人員在國際學術期刊Molecular Cancer Therapeutics 和 Cancer Letters上報道了他們的結果。

研究人員在腫瘤細胞系和腫瘤小鼠模型上檢測了CelePlum-777對癌細胞的殺傷作用。這種新型藥物能夠阻止小鼠體內的腫瘤發育，並且沒有顯著副作用。在這種藥物進入臨床試驗階段之前，還需要進行更多的臨床前研究。目前該藥物已申請專利並授權給Cipher Pharmaceuticals公司，未來將由該公司繼續進行FDA所要求的各種檢測。

4.CCR：抗衰老基因或可成為治療黑色素瘤的新靶點

doi:10.1158/1078-0432.CCR-17-0201

Wistar研究所的科學家們發現一種抗糖尿病藥物可以通過激活一個抗衰老基因進而抑制一個參與轉移進展和抵抗靶向治療的蛋白來抑制老年黑色素瘤病人體內黑色素瘤的生長。相關研究結果在線發表在國際學術期刊Clinical Cancer Research上。

Wistar的科學家們曾經發現腫瘤微環境存在一些衰老相關的變化，這些改變會驅動黑色素瘤進展和治療抵抗。他們還發現Wnt5A這種蛋白能夠促進腫瘤細胞的轉移以及對治療藥物的抵抗和不良預后，Klotho是可以調節Wnt5A的一種抗衰老蛋白。

在這項新研究中研究人員用一種促進Klotho表達降低Wnt5A水平的藥物處理小鼠，發現這種藥物可以抑制老年小鼠體內已經產生治療抵抗的黑色素瘤的生長，但是在年輕小鼠身上並沒有這種效果。

該研究團隊使用了一種人造皮膚模型來重新建立黑色素瘤細胞與年輕或衰老的腫瘤微環境之間的聯繫。他們觀察到Klotho，Wnt5A，黑色素瘤細胞以及腫瘤微環境之間存在錯綜複雜的相互調控關係。他們還發現利用抗糖尿病藥物羅格列酮可以改變Klotho表達進而降低Wnt5A的表達水平。重要的是，羅格列酮聯合靶向治療藥物可以共同抑制年輕和老年小鼠體內的腫瘤生長，單獨使用羅格列酮反而會促進年輕小鼠體內的腫瘤生長而抑制老年小鼠體內腫瘤的生長。

5.PCMR：新研究為黑色素瘤精準治療提供潛在靶點

doi:10.1111/pcmr.12579

一旦腫瘤消耗完原發灶所有的氧氣和營養成分就會向身體其他部位發生轉移尋找更多營養供給。來自美國NIH的研究人員對HIF1a進行了新的研究，該分子在許多種癌症中發揮氧氣和營養成分感受器的作用。他們發現了40個新基因能夠被 HIF1a開啟或關閉，10個基因與黑色素瘤從原發灶向身體其他部位轉移所需要的時間有關。他們將最新研究成果發表在國際學術期刊 Pigment Cell and Melanoma Research 上。

「這些在原發黑色素瘤中新發現的基因和信號通路可以幫助研究人員開發精準治療所需要的新靶點，還可能用於其他癌症的治療，」文章作者Stacie Loftus 博士這樣說道。「除此之外，基因表達的變化（開啟或關閉）還可以在未來用於預測癌細胞如何以及何時發生擴散，以及腫瘤的生長速度。」

6.EBioMedicine：科學家或有望開發出抵禦黑色素瘤擴散的新療法

doi:10.1016/j.ebiom.2017.01.013

日前，來自牛津大學等機構的研究人員通過研究鑒別出了黑色素瘤細胞擴散的新方法，相關研究刊登於Ebiomedicine上，該研究或能幫助科學家們開發新型療法來關閉黑色素瘤細胞中的侵襲性基因，從而實現對黑色素瘤的抑制。

本文研究中研究人員鑒別出了一種新型的可用作靶向藥物開發的靶點，通過抑制細胞切換到侵襲性行為的過程或許就能夠有效抑制黑色素瘤以及其它轉移性癌症的擴散。研究者Smith解釋了兩種類型的行為，同時他還指出，這些行為的主要特點表現為兩種不同的調節性因子MITF（增殖細胞）和BRN2（侵襲性細胞）會進行表達。BRN2能夠降低MITF的表達從而減緩細胞增殖，但同時會使得細胞處於一種侵襲性的模式。

同時研究人員還鑒別出了一種能讓BRN2發生上述作用的新型途徑，首先該途徑會增加另外一種名為NFIB的調節性因子進行表達，從而就能夠控制細胞的侵襲性程序；而NFIB的一個重要靶點就是名為EZH2的酶類，該酶能夠對細胞活性產生全面性的改變，同時其還會促進侵襲性基因的表達並且關閉MITF進而抑制細胞發生增殖，這樣就會增強腫瘤細胞的侵襲性能力。

研究人員認為，一旦細胞離開腫瘤位點其就不再能夠接受信號來誘發開關開啟，因此機體系統就會重置MITF驅動的細胞增殖狀態，從而就能夠促進新發腫瘤在新的位點中形成並且增殖。最後研究者表示，我們發現NFIB-EZH2途徑或許能夠支撐其它類型癌症以及肺癌的轉移，好消息就是目前在臨床試驗中有特殊藥物能夠化學性地抑制EZH2，從而就能夠有效阻斷癌症的侵襲。

7.Mol Cancer Therap：新型藥物或能有效阻斷90%的黑色素瘤轉移

doi:10.1158/1535-7163.MCT-16-0482

日前，刊登在國際雜誌Molecular Cancer Therapeutics上的一項研究報告中，來自密歇根州立大學的研究人員通過研究發現，一種新型的潛在藥物或能降低高達90%的黑色素瘤細胞的擴散。這種人工小分子化合物能夠對黑色素腫瘤細胞中產生RNA分子和特定蛋白質的基因的活性進行靶向作用，特殊的基因活性（或轉錄過程）能夠誘發黑色素瘤擴散，但研究者開發的新型化合物能夠有效對其進行抑制，截止到目前為止，很少有藥物化合物能夠達到這種目的。

研究者指出，這種新型化合物能夠阻斷黑色素瘤細胞中一種名為心肌素相關轉錄因子（MRTFs）的蛋白開啟基因轉錄過程，而這些觸發蛋白又能夠被另一種名為RhoC（Ras同源性C）的蛋白所開啟，RhoC蛋白存在於信號通路中，其能夠促進疾病在機體中快速擴散。這種新型化合物能夠降低85%至90%的黑色素瘤的轉移，同時研究者還發現，這種潛在的藥物還能夠明顯降低注射人類黑色素瘤細胞的小鼠肺部中腫瘤的轉移。

研究者Neubig表示，我們利用完整的黑色素瘤細胞來對化學抑製劑進行篩選，這或許就能夠幫助我們找到有效阻斷RhoC通路的化合物。而阻斷整個通路就能夠幫助研究人員發現MRTF信號蛋白可以用作新型的藥物靶點。闡明這種通路在哪些患者機體中處於開啟狀態對於後期開發新型化合物非常關鍵，因為這或許能夠幫助研究者確定哪些病人最能夠因攝入藥物而獲益，當上述通路處於開啟狀態，新型化合物就能夠有效關閉黑色素瘤細胞的生長，並且抑制疾病進展，因此MRTF蛋白的激活或許就能夠作為一種新型標誌物來幫助確定患者出現黑色素瘤的風險。

8.科學家開發自動化技術可在早期階段檢測黑色素瘤

doi:10.1111/exd.13250

即使是最牛的專家也有可能被黑色素瘤愚弄。患上這種皮膚癌的病人經常會在皮膚上長出一些看起來像痣的東西但是形狀和顏色可能不規則，很難與良性的痣進行區分，因此黑色素瘤的診斷非常困難。現在來自美國洛克菲勒大學的研究人員開發出一種自動化技術，結合影像檢查與數字分析以及機器學習幫助醫生在早期階段檢測病人的黑色素瘤。

在這個新方法中，病變的圖片會經過一系列計算機程序的處理，從中提取顏色數目以及其他可定量數據。這種分析方法會產生一個整體的風險指數，叫做Q指數，代表著發生癌變的可能性。

最近發表在Experimental Dermatology上的一項研究對這種方法的可用性進行了評估，研究表明Q指數在發現早期黑色素瘤方面的正確率很高。對正常痣的正確檢測率為36%，接近皮膚病專家在顯微鏡下對可疑痣的直觀檢測。

研究人員在開發該工具的過程中使用了60張黑色素瘤的圖片和等量的良性生長物圖片，用圖像處理程序進行分析。他們開發了圖像標記物來準確定量生長物的視覺特徵，再利用計算機軟體產生一系列可定量指標來區分兩組圖片。

通過將數據與每一種標誌物進行結合，他們為每張圖片計算出一個Q指數，介於0和1之間，數字越大代表癌變的可能性越大。

9.強大的腸道菌群！竟然影響黑色素瘤病人對免疫治療藥物的應答

新聞來源：Gut microbes linked to immunotherapy response in melanoma patients

在利物浦舉辦的國家癌症研究所（NCRI）癌症會議上，德克薩斯大學安德森癌症中心的科學家介紹了他們的一項最新發現：對於癌細胞已經擴散的惡性黑色素瘤病人來說，如果他們的腸道細菌多樣性更加豐富，他們對免疫治療產生應答的可能性會更大。

參與該研究的科學家們共分析了超過200張嘴和100份腸道菌群樣本，這些樣本都來自晚期黑色素瘤患者。他們發現對免疫治療產生應答的癌症病人其腸道中的細菌多樣性也更加豐富，他們還發現了在應答者和不應答者之間存在顯著差異的細菌類型。病人的口腔細菌類型並沒有差異。

這項研究表明在進行免疫治療之前通過給予抗生素，益生菌或者糞便移植改變腸道菌群能夠增加免疫治療藥物的效果，這些新葯目前已經用於治療幾種不同類型的癌症。但是這還需要進行更進一步的臨床試驗驗證。

10.治療黑色素瘤該選擇靶向治療還是免疫治療？這項研究給你一個答案

doi:10.1001/jamaoncol.2016.4877

大約40%～60%的黑色素瘤存在BRAF蛋白突變。來自加拿大麥克馬斯特大學的研究人員最近發現，對於晚期黑色素瘤病人來說，聯合使用幾種免疫治療方法能夠提高病人生存率，降低危及生命的事件的發生風險。相關研究結果發表在國際學術期刊JAMA Oncology上。

適用於晚期BRAF突變黑色素瘤病人的治療方法主要歸為兩大類：靶向治療，比如化療，能夠阻止癌症生長和擴散；免疫治療，通過刺激免疫系統攻擊腫瘤細胞。但哪種才是最佳的初始治療方法仍然不清楚。這項研究的目的就是評估不同的系統治療方法對診斷為晚期BRAF突變黑色素瘤但尚未接受任何治療的病人的治療效率和安全性。

研究人員分析了2011年到2015年之間發表的15項隨機對照試驗數據，其中共包含6662名癌症病人，這些病人或者是體內的癌細胞已經擴散到淋巴結不適合手術，或者黑色素瘤已經發生遠端轉移。研究人員評估了靶向治療或免疫檢查點抑製劑為這些病人帶來的好處和壞處。他們發現BRAF和MEK聯合靶向治療以及PD-1免疫治療對於改善整體生存率同樣有效。BRAF和MEK聯合抑制對於提高無進展生存率最有效。PD-1抑製劑與顯著降低危及生命事件的風險有關。

11.Cancer Res:添加一味神奇「佐料」 改善T細胞治療黑色素瘤效果

doi:10.1158/0008-5472.CAN-16-0587

來自美國南卡羅萊納醫科大學和芝加哥洛約拉大學的研究人員合作首次證明利用N-乙醯半胱氨酸（NAC）培養用於免疫治療用途的T細胞能夠提高T細胞在黑色素瘤臨床前模型中的治療效率和結果。相關研究結果發表在國際學術期刊Cancer Research上。

臨床試驗數據顯示，高達40%的IV期黑色素瘤病人接受過繼T細胞治療后（adoptive cell therapy，ACT）可存活5年。ACT這種方法主要通過促進病人自身免疫應答對抗癌症從而發揮作用。為了實現這一點，需要收集病人自身T細胞通過基因修飾方法表達處於激活狀態的T細胞受體，然後再快速擴增獲得大量用於治療重注的T細胞。

不過病人對這種治療方法的應答情況不盡相同。注入體內的細胞持續時間越長治療效果越好，但是T細胞在體外的快速擴增會導致T細胞對激活誘導的細胞死亡（AICD）變得更加易感，因此研究人員認為AICD會降低ACT療法的整體效果。

研究人員發現在T細胞體外培養條件中添加NAC能夠防止DNA損傷標記物γH2AX的增加，還可以顯著促進T細胞的存活時間和免疫治療結果，包括抑制腫瘤生長，改善生存情況。

研究發現接近40%利用NAC培養的T細胞可以在腫瘤中被檢測到，相比之下標準方法培養的T細胞只有大約1.2%能夠在腫瘤中被檢測到。研究人員還發現接受NAC培養T細胞治療的小鼠其腫瘤生長得到了顯著抑制。

將NAC加入到現有的培養流程中幾乎不會對病人造成任何危險，NAC已經在臨床上得到許多應用，並且利用NAC培養T細胞的過程也是在病人體外進行。